目的 为提高对成年人的保护效果，开发一种基于M.tb中AhpC抗原的新型结核病亚单位疫苗。方法 利用基因工程技术构建pET28a-AhpC重组质粒，在大肠杆菌中表达并纯化AhpC蛋白；应用WBIA和MFCIA检测AhpC抗原能否被M.tb感染者的外周血T细胞识别；AhpC/IC31疫苗诱导的免疫应答通过小鼠免疫实验进行评估，并通过ELISA和细胞因子检测进一步评估该疫苗的免疫原性和保护潜力。结果 成功构建并表达了重组AhpC抗原；rAhpC在M.tb感染者外周血中诱导了显著高水平的INF-γ、IL-6和TNF-α反应；AhpC/IC31成功诱导小鼠产生强烈的Th1型免疫应答，且在BCG初免后予以增强免疫，可刺激更高的免疫应答水平和保护潜力。结论 本研究提供了一种新型TB亚单位疫苗的候选靶抗原，为预防成人结核病、保护M.tb潜伏感染者提供了理论和实验依据。

安徽理工大学医学专项培育基金资助项目(YZ2023H2C006,YZ2023H1B003)；

1 材料
1.1 质粒、菌株及主要试剂
1.2 实验动物
2 方法
2.1 引物设计
2.2 重组质粒构建表达以及纯化
2.3 检测外周血各细胞因子表达水平
2.4 小鼠分组及免疫
2.5 小鼠血清抗原特异性抗体水平检测
2.6 小鼠脾细胞上清细胞因子水平测定
2.7 统计学分析
3 结果
3.1 成功构建pET28a-AhpC
3.2 成功表达及纯化蛋白并进行鉴定
3.3 WBIA检测受试者外周血INF-γ水平
3.4 MFCIA检测抗原特异性多细胞因子水平
3.5 小鼠血清特异性抗体滴度水平
3.6 小鼠脾细胞特异性细胞因子水平
4 讨论
5 结论与展望

[1]王晓春,孔令雲,许礼发,等.基于AhpC抗原的新型结核病亚单位疫苗的研究[J].安徽理工大学学报(自然科学版),2024,44(05):91-99.